新藥研發(fā)的六個(gè)主要步驟
　　

　　一、研發(fā)靶標(biāo)的確立、新藥物實(shí)體的發(fā)現(xiàn)和確立

　　根據(jù)化學(xué)或生物學(xué)藥物設(shè)計(jì)、天然藥物、生物藥物既有的經(jīng)驗(yàn)理論、偶然的發(fā)現(xiàn)或現(xiàn)有臨床的經(jīng)驗(yàn)啟發(fā)等等確立研發(fā)靶標(biāo)及新藥物實(shí)體（化學(xué)或生物實(shí)體）的來源方案。

　　1、天然物的提取和篩選

　　植物：長春花——長春堿、長春新堿　　太平洋紅豆杉樹——紫杉醇
　　動(dòng)物：胰島素、激素、天花疫苗

　　2、有機(jī)合成和篩選
　　分子設(shè)計(jì)　　合成　　體外、體內(nèi)的活性篩選　　特異性疾病動(dòng)物模型篩選（藥效、藥代等）　　化合物結(jié)構(gòu)優(yōu)化　　再評價(jià)　　新化合物實(shí)體（NCE）

　　3、既有藥物的分子改造（藥物的升級換代） 
    頭孢菌素：從第一代發(fā)展到第四代，其抗菌范圍和抗菌活性也不斷擴(kuò)大和增強(qiáng)。

　　4、生物制品實(shí)體的設(shè)計(jì)、發(fā)現(xiàn)和篩選

　　5、其他途徑：如既有藥物的適應(yīng)癥的拓展和轉(zhuǎn)變、復(fù)方的研發(fā)等
　　

　　二、臨床前研究

　　1、化學(xué)或生物實(shí)體的工藝研發(fā)及產(chǎn)品制備
    開發(fā)出符合新藥申報(bào)要求的化合物實(shí)體制備工藝研發(fā)，并按照該工藝制備足夠量的化合物實(shí)體(藥物)用以臨床前試驗(yàn)、臨床研究、小規(guī)模和大規(guī)模制劑制備等等，每一步必須進(jìn)行質(zhì)量控制和驗(yàn)證。

　　該部分為確立（化學(xué)、生物）藥物實(shí)體后臨床前研發(fā)的主體工作；

　　該部分研發(fā)是系統(tǒng)的體系，需要嚴(yán)格依據(jù)相應(yīng)指導(dǎo)原則等的要求，過程和結(jié)果必須符合指導(dǎo)原則、結(jié)果必須考慮放大和生產(chǎn)的可能性、藥品的有效性和安全性（兩方面都必須與既有的類似品種對照）、原料藥/制劑/藥理藥代的過程系統(tǒng)配合和效果融合等等；

　　研發(fā)過程中不斷的判斷宏微觀效果、并作方案的調(diào)整、優(yōu)化和再評價(jià)，并在不同的階段作出相應(yīng)的決策。

　　2、生物學(xué)特性研發(fā)及方案確立

　　目的：判斷一個(gè)化合物是否具有足夠的安全性和有效性，使之繼續(xù)成為一個(gè)有前景的新藥，必須經(jīng)過全面研究以獲得有關(guān)藥效；如何吸收、在體內(nèi)的整個(gè)分布/積蓄/代謝/排泄的情況；以及如何作用于機(jī)體的細(xì)胞、組織和器官。

　　參入范圍：需要應(yīng)用于新藥開發(fā)的生物學(xué)家、微生物學(xué)家、分子生物學(xué)家、生物化學(xué)家、遺傳學(xué)家、藥理學(xué)家、生理學(xué)家、藥物動(dòng)力學(xué)家、病理學(xué)家、毒理學(xué)家、統(tǒng)計(jì)學(xué)家等參與共同完成。
　　A、藥理學(xué)

　　a、與治療作用有關(guān)的主要藥效學(xué)研究

　　受試樣品：API相關(guān)事宜；

　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：離體動(dòng)物組織、整體動(dòng)物試驗(yàn)（嚙齒動(dòng)物和非嚙齒動(dòng)物）

　　實(shí)驗(yàn)方法：

　　體外實(shí)驗(yàn)：分子水平--酶系統(tǒng)工作
    細(xì)胞水平：體外細(xì)胞培養(yǎng)和樣品測試
　　組織、器官水平

　　整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

　　實(shí)驗(yàn)分組： 空白（模型）對照
               陽性藥對照
               樣品：低劑量、中劑量、高劑量
　　給藥方式：靜脈注射(iv)、腹腔注射(ip)、口服(po)、皮下注射(sc)、灌胃(ig)；

　　生物統(tǒng)計(jì)處理
　　b、一般藥理學(xué)研究

　　目的：了解新藥主要藥效作用以外的廣泛藥理作用。
　　指導(dǎo)原則：“當(dāng)發(fā)現(xiàn)一種化合物具有某種藥理活性時(shí)，應(yīng)進(jìn)行廣泛的動(dòng)物藥理學(xué)試驗(yàn)，以測定其是否具有任何可供治療應(yīng)用的作用”。“應(yīng)在機(jī)體的主要器官系統(tǒng)上進(jìn)行綜述，以揭示藥物的其它作用，不論這種作用是希望的，還是不希望的”。

　　主要觀察指標(biāo)：

　　精神神經(jīng)系統(tǒng)
　　心血管系統(tǒng)
　　呼吸系統(tǒng)
　　其它

　　c、急性毒性試驗(yàn)

　　目的：觀察受試樣品一次給予動(dòng)物后所引起的毒性反應(yīng)和死亡情況。
　　動(dòng)物：
　　樣品：
　　方法：劑量選擇
      　　給藥途徑、體積
      　　觀察指標(biāo)
　　結(jié)果：LD50或最大給藥量
　　Note: LD50是半數(shù)致死劑量，指在預(yù)定時(shí)間之內(nèi)，如96h，導(dǎo)致50%被暴露個(gè)體死亡的劑量。常與ED50【半最大效應(yīng)濃度】配合計(jì)算治療指數(shù)LD50/ED50，用以評價(jià)藥物的安全性，治療指數(shù)大的藥物相對安全
　　d、大鼠、犬長期毒性試驗(yàn)

　　目的：觀察受試樣品連續(xù)給予動(dòng)物后所引起的毒性反應(yīng)和嚴(yán)重程度， 提供毒性反應(yīng)的靶器官及損害的可逆性，確定無毒反應(yīng)劑量。

　　動(dòng)物：
　　樣品：
　　方法：試驗(yàn)分組：對照組、低、中、高劑量
    　　　動(dòng)物數(shù)：
      　　給藥方法：
      　　檢測指標(biāo)：
   　　　一般觀察、血液學(xué)、血液生化、尿液、系統(tǒng)尸解、組織病理學(xué)、心電圖（只對犬）、其它；
      　　恢復(fù)性觀察

　　資料整理

　　e、皮膚刺激試驗(yàn)

　　目的：觀察動(dòng)物皮膚接觸受試物后所產(chǎn)生的刺激反應(yīng)情況。
　　試驗(yàn)材料：動(dòng)物
    　　　　　受試物
　　試驗(yàn)方法：用藥后不同時(shí)間，觀察用藥部位紅斑，水腫情況。

　　結(jié)果判斷：表1、2

　　f、致突變試驗(yàn)

　　根據(jù)受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及對遺傳物質(zhì)作用終點(diǎn)的不同，進(jìn)行微生物回復(fù)突變試驗(yàn)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)、動(dòng)物微核試驗(yàn)

　　微生物回復(fù)突變試驗(yàn)
    組胺酸缺陷型鼠傷寒沙門氏菌
    　　樣品（溶媒，陽性藥）              回變菌落數(shù)
　　　　哺乳動(dòng)物肝微粒體酸（S9）
　　結(jié)果判定：
　　受試物誘發(fā)的回變菌落數(shù)增加，超過對照2倍，有量效關(guān)系。

　　某測試點(diǎn)超過對照2倍以上，可重復(fù)并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)
　　中國倉鼠肺細(xì)胞                   
　　樣品（溶媒，陽性藥）                        染色體畸形率

　　s9                                 

　　結(jié)果判定：
　　受試物誘發(fā)的染色體畸變數(shù)的增加劑量相關(guān)。
　　某一側(cè)試點(diǎn)呈現(xiàn)可重復(fù)的，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加。
　　嚙齒動(dòng)物微核試驗(yàn)
　　NIH小鼠——給樣品(溶媒、陽性藥)

    取骨髓、涂片、染色

    微核出現(xiàn)頻度        
　　結(jié)果判定：
　　受試物誘發(fā)微核頻率的增加與劑量相關(guān)。
　　某一測試點(diǎn)微核增加可呈重復(fù)，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加
　　生殖毒性試驗(yàn)

　　1、一般生殖毒性試驗(yàn)

　　設(shè)計(jì)：合籠前給藥，♂，60-80d，♀，14d。孕后雌鼠繼續(xù)給藥至多數(shù)器官形成期。
　　觀察指標(biāo)：一般狀況，體重、受孕率、死胎數(shù)、活胎數(shù)及重量。外觀及內(nèi)臟和骨骼變化。
　　2、致畸敏感期毒性試驗(yàn)
   設(shè)計(jì)：于胚胎器官形成期給藥，大鼠孕后6-15d，小鼠 6-15d，兔6-18d，20d處死動(dòng)物。
   計(jì)錄指標(biāo)：孕鼠重、黃體數(shù)、死胎數(shù)、活胎數(shù)、活胎重、性別、外觀、1/2胎仔作內(nèi)臟檢查，1/2胎仔作骨骼檢查。
　　3、圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)

　　設(shè)計(jì)：孕中后期開始給藥，至產(chǎn)后21d（小鼠），28d（大鼠），31d（兔）。

　　記錄指標(biāo)：母體及胎仔情況，包括子代生長發(fā)育情況。
　　致癌試驗(yàn)

　　1、短期致癌試驗(yàn)：哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、小鼠肺腫瘤誘發(fā)短期試驗(yàn)

　　2、動(dòng)物長期致癌試驗(yàn)？
　　藥物依賴性試驗(yàn)

　　1、身體依賴性試驗(yàn)：

　　自然戒斷試驗(yàn)
    替代試驗(yàn)
    催促試驗(yàn)
    誘導(dǎo)試驗(yàn)

　　2、精神依賴性試驗(yàn) ??
　　

　　Ｂ、藥代動(dòng)力學(xué)

　　ADME（吸收：absorption、分布：distribution、代謝：metabolism及排泄excretion ）

　　方法：及時(shí)收集和分析尿液、血液和糞便樣品及對動(dòng)物解剖后的組織和器官。

　　目的：
　　藥物從各種途徑給藥后的吸收程度和速度，包括一種推薦為人體給出藥的途徑。
　　藥物在體內(nèi)的分布速度和藥物滯留部位及持續(xù)的時(shí)間。
　　藥物在體內(nèi)的代謝的速度、初級和次組位點(diǎn)及機(jī)理，以及代謝物化學(xué)性質(zhì)和藥理學(xué)。
　　藥物從體內(nèi)消除的比例及消除的速率和途徑。

　　藥動(dòng)學(xué)研究側(cè)重內(nèi)容

　　藥物在生物樣品中的分離和測定
    1、靈敏度
    2、特異性
    3、重現(xiàn)性
    4、標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率
    5、待測樣品測定

　　藥動(dòng)學(xué)參數(shù)測定
　　1、藥時(shí)曲線

　　2、主要參數(shù)
　　靜脈注射：t1/2(α)、t1/2(β)（分布）、K12、K10、Vd（表觀分布容積 ）、CL（藥物清除率）、AUC（AUC: Area Under Curve ）

　　血管外給藥：Ka、t1/2、CL、Vd、Cmax（峰濃度）、Tmax（達(dá)峰時(shí)間）、AUC
　　藥物的分布　

　　藥物的排泄

　　血漿蛋白結(jié)合
　　

　　Ｃ、毒理學(xué)

　　Ｄ、處方研究

　　物化性質(zhì)
　　溶解度
　　分配系數(shù)
　　溶解速率
　　物理形態(tài)
　　穩(wěn)定性
　　擬定、研發(fā)最初處方
    I期臨床試驗(yàn)期間，對于口服給藥，直接應(yīng)用僅含活性藥物無其他藥用輔料的膠囊劑。II期臨床試驗(yàn)的處方通常含少量有藥用輔料。在II期臨床試驗(yàn)期間，最終的劑型被選擇和開發(fā)作III期臨床使用并代表了提交FDA上市申請的處方。

　　最初的處方設(shè)計(jì)
　　　　
　　三、研究新藥申請（IND，即申請臨床試驗(yàn)）

　　遞交申請（臨床研究方案）
　　SFDA(或其他）審核
　　發(fā)補(bǔ)、獲得臨床批件

　　四、臨床試驗(yàn) 臨床前研究（繼續(xù)）補(bǔ)充

　　表：臨床試驗(yàn)的分期

　　★新藥的分類(SFDA)

　　中藥、天然藥物注冊分類

　　1、未在國內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物中提取的有效成份及其制劑;
　　2、未在國內(nèi)上市銷售的來源于植物、動(dòng)物、礦物等藥用物質(zhì)制成的制劑;
　　3、中藥材的代用品;
　　4、未在國內(nèi)上市銷售的中藥材新的藥用部位制成的制劑;
　　5、未在國內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效部位制成的制劑;
　　6、未在國內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的復(fù)方制劑;
　　7、未在國內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的注射劑;
　　8、改變國內(nèi)已上市銷售藥品給藥途徑的制劑;
　　9、改變國內(nèi)已上市銷售藥品劑型的制劑;
　　10、改變國內(nèi)已上市銷售藥品工藝的制劑;
　　11、已有國家標(biāo)準(zhǔn)的中成藥和天然藥物制劑。
　　

　　化學(xué)藥品注冊分類

　　1、未在國內(nèi)外上市銷售的藥品：
  （1）通過合成或者半合成的方法制得的原料藥及其制劑；
  （2）天然物質(zhì)中提取或者通過發(fā)酵提取的新的有效單體及其制劑；
  （3）用拆分或者合成等方法制得的已知藥物中的光學(xué)異構(gòu)體及其制劑；
  （4）由已上市銷售的多組份藥物制備為較少組份的藥物;
  （5）新的復(fù)方制劑；
　　2、改變給藥途徑且尚未在國內(nèi)外上市銷售的制劑;
　　3、已在國外上市銷售但尚未在國內(nèi)上市銷售的藥品：
  （1）已在國外上市銷售的原料藥及其制劑；
  （2）已在國外上市銷售的復(fù)方制劑
  （3）改變給藥途徑并已在國外上市銷售的制劑。
　　4、改變已上市銷售鹽類藥物的酸根、堿基（或者金屬
   元素），但不改變其藥理作用的原料藥及其制劑。
　　5、改變國內(nèi)已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途
   徑的制劑。
　　6、已有國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的原料藥或者制劑

　　生物制品注冊分類

　　1.  未在國內(nèi)外上市銷售的生物制品。
　　2.  單克隆抗體。
　　3.  基因治療、體細(xì)胞治療及其制品。
　　4.  變態(tài)反應(yīng)原制品。
　　5.  由人的、動(dòng)物的組織或者體液提取的，或者通過發(fā)酵制備的具有生物活性的多組份制品。
　　6.  由已上市銷售生物制品組成新的復(fù)方制品。
　　7.  已在國外上市銷售但尚未在國內(nèi)上市銷售的生物制品。
　　8.  含未經(jīng)批準(zhǔn)菌種制備的微生態(tài)制品。
　　9.  與已上市銷售制品結(jié)構(gòu)不完全相同且國內(nèi)外均未上市銷售的制品（包括氨基酸位點(diǎn)突變、缺失，因表達(dá)系統(tǒng)不同而產(chǎn)生、消除或者改變翻譯后修飾，對產(chǎn)物進(jìn)行化學(xué)修飾等）。
　　10.  與已上市銷售制品制備方法不同的制品（例如采用不同表達(dá)體系、宿主細(xì)胞等）。
　　11.  首次采用DNA重組技術(shù)制備的制品（例如以重組技術(shù)替代合成技術(shù)、生物組織提取或者發(fā)酵技術(shù)等）。
　　12.  國內(nèi)外尚未上市銷售的由非注射途徑改為注射途徑給藥，或者由局部用藥改為全身給藥的制品。
　　13.  改變已上市銷售制品的劑型但不改變給藥途徑的生物制品。
　　14.  改變給藥途徑的生物制品（不包括上述12項(xiàng)）。
　　15.  已有國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的生物制品。

　　★發(fā)現(xiàn)新藥的途徑

　　定向篩選：設(shè)計(jì)某一特定的疾病模型或觀察指標(biāo)；設(shè)計(jì)、合成一定結(jié)構(gòu)的化合物進(jìn)行篩選；

　　廣泛篩選：有目的、有針對性的對大量樣品進(jìn)行廣泛的活性篩選，以供進(jìn)一步研究，如化學(xué)藥物所用的高通量篩選、生物菌株等的廣泛篩選等；

　　一藥多篩：建立模擬人類疾病的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，即篩選系統(tǒng)，對每樣品進(jìn)行系統(tǒng)篩選；

　　藥效關(guān)系研究：化學(xué)結(jié)構(gòu)相似或立體結(jié)構(gòu)相似的化合物，可能具有相似或相反的生物活性。 （圖1-1，1-2）；　

　　新方法、新技術(shù)：評價(jià)生物活性的新方法、新技術(shù)，對于發(fā)現(xiàn)新的活性物質(zhì)致關(guān)重要；如對高通量篩選的反思、對現(xiàn)有評價(jià)思路的反思和發(fā)展（藥效、藥代效果甚至制劑方法等的綜合考量）；

　　偶然發(fā)現(xiàn)：建立在大量的研發(fā)工作和細(xì)心全面的總結(jié)的基礎(chǔ)上，如“偉哥”的發(fā)現(xiàn)。

小資料：

　　Ⅲ期臨床試驗(yàn)
　　

　　治療作用確證階段。其目的是進(jìn)一步驗(yàn)證藥物對目標(biāo)適應(yīng)癥患者的治療作用和安全性，評價(jià)利益與風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系，最終為藥物注冊申請的審查提供充分的依據(jù)。試驗(yàn)一般應(yīng)為具有足夠樣本量的隨機(jī)盲法對照試驗(yàn)。 Ⅲ期臨床試驗(yàn)中對照試驗(yàn)的設(shè)計(jì)要求原則上與Ⅱ期盲法隨機(jī)對照試驗(yàn)相同，但Ⅲ期臨床的對照試驗(yàn)可以設(shè)盲也可以不設(shè)盲進(jìn)行隨機(jī)對照開放試驗(yàn)（Randomized Controlled Open Labeled Clinical Trial）。某些藥物類別，如心血管疾病藥物往往既有近期試驗(yàn)?zāi)康娜缬^察一定試驗(yàn)期內(nèi)對血壓血脂的影響，還有長期的試驗(yàn)?zāi)康娜绫容^長期治療后疾病的死亡率或嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生率等，則Ⅱ期臨床試驗(yàn)就不單是擴(kuò)大Ⅱ期試驗(yàn)的病例數(shù)，還應(yīng)根據(jù)長期試驗(yàn)的目的和要求進(jìn)行詳細(xì)的設(shè)計(jì)，并做出周密的安排，才能獲得科學(xué)的結(jié)論。
　　

　?、羝谂R床試驗(yàn)
　　IV期臨床試驗(yàn)為新藥上市后由申請人進(jìn)行的應(yīng)用研究階段。其目的是考察在廣泛使用條件下的藥物的療效和不良反應(yīng)、評價(jià)在普通或者特殊人群中使用的利益與風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系以及改進(jìn)給藥劑量等。 IV期臨床試驗(yàn)技術(shù)特點(diǎn)： ① Ⅳ期臨床試驗(yàn)為上市后開放試驗(yàn)，不要求設(shè)對照組，但也不排除根據(jù)需要對某些適應(yīng)癥或某些試驗(yàn)對象進(jìn)行小樣本隨機(jī)對照試驗(yàn)。 ② Ⅳ期臨床試驗(yàn)病例數(shù)按SDA規(guī)定，要求>2000例。 ③ Ⅳ期臨床試驗(yàn)雖為開放試驗(yàn)，但有關(guān)病例入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)、退出標(biāo)準(zhǔn)、療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、不良反應(yīng)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、判定療效與不良反應(yīng)的各項(xiàng)觀察指標(biāo)等都可參考Ⅱ期臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)要求。

　　臨床研究的時(shí)間長短取決于藥品本身的特性及適應(yīng)癥的治療周期，不用適應(yīng)癥的藥品臨床試驗(yàn)的治療周期相差很大，譬如，一個(gè)止血藥的一例病人的臨床研究只需一兩天就完成；但一個(gè)治療癲癇的藥品，一例病人的臨床研究周期起碼需要3-6個(gè)月以上。