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整合轉(zhuǎn)錄組和生理學(xué)分析,闡明蕎麥與氧化石墨烯的分子反應(yīng)

 新用戶2811C1UV 2022-08-03 發(fā)布于上海

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《Journal of Hazardous Materials》

影響因子:10.588

派森諾與成都大學(xué)攜手合作,在國(guó)際著名雜志《Journal of Hazardous Materials》發(fā)表了蕎麥對(duì)于氧化石墨烯反應(yīng)的研究成果。

術(shù)

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蕎麥?zhǔn)且环N重要的雜糧經(jīng)濟(jì)作物,因其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、保健功能強(qiáng),是健康食品生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)原料,廣受人們喜愛(ài),市場(chǎng)潛力巨大。然而,近十年來(lái)我國(guó)蕎麥產(chǎn)量一直低而不穩(wěn),產(chǎn)量難以突破,嚴(yán)重制約蕎麥產(chǎn)業(yè)發(fā)展。論文圍繞蕎麥產(chǎn)量關(guān)鍵制約因素,探索新興納米生物技術(shù)在蕎麥生產(chǎn)中的創(chuàng)新應(yīng)用,為蕎麥及至其它農(nóng)作物產(chǎn)量提升和高效生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1、實(shí)驗(yàn)材料

本研究使用的是川蕎1號(hào)品種,通過(guò)不同濃度的GO溶液處理,培養(yǎng)幼苗進(jìn)行分析。

2、測(cè)序平臺(tái)

Illumina NovaSeq

3、分析內(nèi)容

電鏡和拉曼分析,生化分析,轉(zhuǎn)錄組分析,qRT-PCR實(shí)驗(yàn)等。

結(jié)

1.GO溶液對(duì)蕎麥幼苗生長(zhǎng)的影響

不同濃度GO溶液處理下的幼苗,如圖1A所示,在高濃度GO處理下,幼苗生長(zhǎng)受到明顯的抑制,且全苗、根和芽的重量和長(zhǎng)度都受到抑制(圖1B-G)。這些數(shù)據(jù)表明,GO對(duì)蕎麥的生長(zhǎng)有一定的抑制作用。

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圖1.GO對(duì)蕎麥幼苗生長(zhǎng)的影響

2.通過(guò)轉(zhuǎn)錄組分析確定GO脅迫的DEGs

為了進(jìn)一步了解GO對(duì)蕎麥幼苗生長(zhǎng)的調(diào)控分子機(jī)制,通過(guò)轉(zhuǎn)錄組分析,確定了GO脅迫下的DEGs,其中895個(gè)基因在根中差異表達(dá),1042個(gè)基因在莖中差異表達(dá),102個(gè)基因在根和莖中均差異表達(dá)(圖2D-E),通過(guò)維恩圖分析比較了CK和LG/HG之間的DEGs,確定了2039個(gè)DEGs且表達(dá)模式多樣(圖2C)。對(duì)所有DEGs以及對(duì)根和莖中DEGs進(jìn)行基因富集分析(圖3A-C),表明根和莖可能表現(xiàn)出對(duì)GO脅迫的不同反應(yīng)。

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圖2. GO響應(yīng)基因的鑒定

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圖3.GO響應(yīng)基因的基因本體富集分析

3.表觀遺傳調(diào)控和細(xì)胞周期相關(guān)基因的表達(dá)分析

本研究中,發(fā)現(xiàn)有31個(gè)編碼組蛋白的基因受到GO脅迫調(diào)控。其中包括1個(gè)組蛋白H1基因,9個(gè)組蛋白H2A基因,4個(gè)組蛋白H2B基因,5個(gè)組蛋白H3基因,以及12個(gè)組蛋白H4基因,這些基因表達(dá)在莖中被100mg/L GO脅迫上調(diào),但對(duì)更高濃度GO處理的反應(yīng)很不明顯,在根中表達(dá)不顯著(圖4A)。從2039個(gè)DEGs中鑒定出編碼細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的19個(gè)DEGs,這些基因都顯示在GO脅迫下表達(dá)上調(diào)了(4B-E)。

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圖4.參與細(xì)胞周期和表觀遺傳調(diào)控的基因表達(dá)分析

4. 確定參與ROS解毒的DEGs

本研究從2039個(gè)DEGs中鑒定出36個(gè)參與ROS解毒的DEGs,包括22個(gè)PER、8個(gè)GST、3個(gè)LEA、2個(gè)GRX和1個(gè)ASO編碼基因,這些基因在GO處理下顯示出不同的基因表達(dá)模式(圖5)。在GST基因中,大多數(shù)對(duì)根中的GO脅迫有反應(yīng),GO脅迫還抑制LEA基因的表達(dá),此外,F(xiàn)tASOL和FtGRXC9基因在根和莖中均表現(xiàn)出反向表達(dá)模式。

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圖5.參與ROS解毒的基因表達(dá)分析

5. GO脅迫下植物激素生物合成及信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)分析

研究者分析了參與植物激素生物合成和信號(hào)傳導(dǎo)的DEGs,包括生長(zhǎng)素、脫落酸(ABA)、乙烯(ETH)、茉莉酸(JA)、赤霉素(GA)和細(xì)胞分裂素(CTK),共發(fā)現(xiàn)40個(gè)參與激素生物合成和信號(hào)通路的GO響應(yīng)DEGs,大多數(shù)ABA、ETH、JA、GA和CTK生物合成和信號(hào)相關(guān)的DEGs的表達(dá)在GO脅迫下被下調(diào)(圖6),這表明GO可能抑制這些激素的產(chǎn)生和功能。

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圖6.植物激素生物合成及信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)分析

6. 蕎麥中GO反應(yīng)性SSPs的鑒定

研究者鑒定出97個(gè)SSPs編碼基因,其中42個(gè)為已知SSPs,且有不同的表達(dá)模式(圖7)。研究還分析了RLKs和SSPs編碼基因表達(dá)的相關(guān)性,除FtLECRK41-2、FtSOBIR1和FtCRK10之外的所有RLK基因都與一個(gè)或多個(gè)SSP基因的表達(dá)高度相關(guān)(圖8),這表明SSP基因可能通過(guò)與RLKs合作來(lái)調(diào)節(jié)GO反應(yīng)。

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圖7.GO反應(yīng)性SSPs基因的表達(dá)

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圖8. SSP和RLK之間的相關(guān)性

結(jié)

本文綜合分析了蕎麥在GO脅迫下形態(tài)、生理和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的變化,共鑒定了2039個(gè)DEGs,其中有36個(gè)基因參與ROS解毒,表明GO可能通過(guò)調(diào)節(jié)ROS解毒來(lái)影響植物生長(zhǎng)。根和莖對(duì)GO脅迫有不同的轉(zhuǎn)錄組學(xué)反應(yīng),在莖中發(fā)現(xiàn)了參與細(xì)胞周期和表觀遺傳調(diào)控的DEGs,還有40個(gè)參與植物激素生物合成的基因受到GO的顯著調(diào)控。此外,發(fā)現(xiàn)了97個(gè)SSPs編碼基因參與GO反應(yīng),并提出了由TFs-SSPs-RLKs介導(dǎo)的反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)。本研究為探索GO與植物之間的相互作用提供了有用的信息。

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