軟件：Graphpad prism 9

數(shù)據(jù)：以qpcr的R2-△△Ct值為例（2組，每組10個生物學重復樣本）

方法：

1. 打開Graphpad prism 9，選擇Column

2. 復制qpcr的R2-△△Ct數(shù)據(jù)，粘貼

3. 找到Graphs（圖），點擊以上數(shù)據(jù)對應的名稱,就會出現(xiàn)圖形了

4. 選擇圖形，圖形有Individual values，Box and violin，Mean/median & error，可以選擇自己喜歡的圖形，這里選擇Individual values中的第二個，如下圖；plot選擇“mean with SEM”（均數(shù)加減標準誤），SEM為標準誤，與SD關系為SEM=SD/Sqrt(n)，因此SEM會遠小于SD，作圖會更好看些

5. 接下來是調整圖形的顏值，

（1）調整命名，如刪除Data1和Xtitle標題，點擊Y軸重新命名

（2）通過change版塊調整

：更換圖表類型；

：調整圖形的大小

：選擇colors，默認選擇藍色和紅色

：改變X軸和Y軸的信息

：改變柱子的外觀

我們根據(jù)以上方法，按照自己喜歡的風格，得到的圖形如下：

6. 統(tǒng)計學分析

（1）確定統(tǒng)計方法

（2）需要確定是否符合正態(tài)分布：

點擊Analysis，選擇Column analyses——選擇Normality and Lognormality Tests，即正態(tài)性檢驗

3. 看正態(tài)分布檢測結果，一般認為，P>0.05時，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布。這里有幾個檢測，都滿足了正態(tài)分布，可以考慮用參數(shù)檢驗中的t檢驗（如果不滿足，則選擇非參數(shù)檢驗）

備注：結果列表中，當幾種檢驗不一致時，小樣本以shaprio-wilk test為準，大樣本以kolmogorov-smimov test為準。

4. 點擊Analysis，選擇Column analyses——選擇t tests(and nonparametric tests)即T檢驗或者非參數(shù)檢驗

Paired:同一個對象處理/給藥前后的差異

Unpaid：兩組比較，例如對照組vs實驗組

5. 查看結果，P值>0.05,故滿足方差齊性。(注意，如果不符合方差齊性，需要重新進行T檢驗，choose test選擇Wech’s矯正，再重復一次分析)

6. 顯著性分析結果

7. 顯著性分析結果作圖，prism 9以上的版本，可選擇自動增加顯著性分析作圖Draw-Automatically add painwise comparisons，然后保存圖片即可，建議保存矢量圖格式，如PDF，也方便后續(xù)在AI上編輯。

如需獲取更多技術資料，可關注華丘生物官網(wǎng)：www.