由于長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的周期長(zhǎng)、人力財(cái)力耗費(fèi)較多，因此開(kāi)展試驗(yàn)前應(yīng)科學(xué)、合理的設(shè)計(jì)劑量。并且遵循“具體問(wèn)題具體分析”原則。

     試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和理化性質(zhì)、同類化合物在國(guó)內(nèi)或國(guó)外的臨床使用情況、臨床適應(yīng)證和用藥人群、臨床用藥方案、相關(guān)的藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)和毒理學(xué)研究信息等綜合考慮。

一、化學(xué)藥物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（2005.03）

③推測(cè)臨床試驗(yàn)的起始劑量和重復(fù)用藥的安全劑量范圍；

④提示臨床試驗(yàn)中需重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的指標(biāo)；

⑤為臨床試驗(yàn)中的解毒或解救措施提供參考。

• 通過(guò)已有資料達(dá)到長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的目的，為臨床試驗(yàn)和臨床用藥提供支持，可以不必進(jìn)行長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)。
• 原則上，如果已有資料尚不能達(dá)到長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的目的，從保證臨床用藥安全的角度就應(yīng)該進(jìn)行長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)；

④ 隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)

• 應(yīng)采用制備工藝穩(wěn)定、符合臨床試驗(yàn)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的樣品。
• 受試物應(yīng)注明名稱、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件及配制方法等，并附有研制單位的自檢報(bào)告。

• 所用輔料、溶媒等應(yīng)注明批號(hào)、規(guī)格和生產(chǎn)廠家，并符合試驗(yàn)要求。

• 若受試物的制備工藝發(fā)生可能影響其安全性的變化，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的安全性研究。

• 理想的動(dòng)物應(yīng)具有以下特點(diǎn)：
• 對(duì)受試物的生物轉(zhuǎn)化與人體相近；
• 對(duì)受試物敏感；
• 已有大量歷史對(duì)照數(shù)據(jù)。

• 在大多數(shù)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，尚無(wú)法判斷不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人體對(duì)受試物的生物轉(zhuǎn)化的一致性，通常以大鼠和Beagle 犬或猴作為長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

• 某些特殊結(jié)構(gòu)的受試物應(yīng)選用特殊種屬或品系的動(dòng)物進(jìn)行長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，必要時(shí)，也可選用疾病模型動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。

• 我國(guó)藥政部門(mén)規(guī)定基本原則選用兩種動(dòng)物，一種嚙齒類，首選大白鼠（SD）；另一種非嚙齒類，首選狗（Beagle 犬）。
  

• 在吸入給藥時(shí)，首選猴，因?yàn)樵诤粑到y(tǒng)的解剖學(xué)和生理學(xué)方面比其他動(dòng)物更接近人類。

• 如研究計(jì)劃生育用藥，應(yīng)選擇猴或其他大動(dòng)物。

1. 一般選擇正常、健康和未孕的動(dòng)物，動(dòng)物體重差異應(yīng)在平均體重的 20％之內(nèi)。

2. 動(dòng)物應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定的等級(jí)要求，來(lái)源、品系、遺傳背景清楚，并具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證。嚴(yán)格控制環(huán)境條件，避免不必要的干擾因素

3. 應(yīng)根據(jù)研究期限的長(zhǎng)短和受試物臨床應(yīng)用的患者群確定動(dòng)物的年齡。

   動(dòng)物年齡應(yīng)盡量一致，一般大鼠 6～9 周齡，Beagle 犬 6～12 月齡。

• 原因是較年輕或正處于發(fā)育階段的動(dòng)物對(duì)毒性反應(yīng)較敏感；年齡較大的動(dòng)物反應(yīng)性降低，存在許多自發(fā)性疾病干擾試驗(yàn)結(jié)果。

一般大鼠為雌、雄各 10～30 只，Beagle 犬或猴為雌、雄各 3～6 只。

• 在特殊情況下如藥物對(duì)雄性(或雌性)生殖細(xì)胞的毒效應(yīng)已確知，或者急性試驗(yàn)已證明藥物對(duì)雌雄兩性動(dòng)物的毒性有明顯差別時(shí)，就應(yīng)主要選用敏感性別的動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。

• 動(dòng)物數(shù)量：

• 90天以內(nèi)的試驗(yàn)

• 嚙齒類動(dòng)物每組至少20只(雌雄各10只);

• 非嚙齒類每組6只(雌雄各3只)；

• 超過(guò)90天的試驗(yàn)

• 嚙齒類動(dòng)物每組至少40只(雌雄各20只);

• 非嚙齒類每組8~10只(雌雄各4~5只)。

• 飼養(yǎng)條件：

• 適宜溫度為18~26℃。

• 相對(duì)濕度為40%~70%。

• 光照宜持續(xù)12h明亮,12h黑暗。

• 通風(fēng)條件良好。

• 所用飼料應(yīng)符合動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。

• 雌雄動(dòng)物應(yīng)分開(kāi)飼養(yǎng)，每籠不宜超過(guò)5只。

• 因?yàn)?span>理論上群體中毒性反應(yīng)的發(fā)生率隨暴露量的增加而增加，

• 所以：

• 高劑量原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至出現(xiàn)個(gè)別動(dòng)物死亡。但死亡率控制在10%以內(nèi)。

• 低劑量原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)的等效劑量，并不使動(dòng)物出現(xiàn)毒性反應(yīng)（理想狀態(tài)下應(yīng)等同或略高于患者擬用（或已知）的最高劑量。但該理想狀態(tài)并非總是可以達(dá)到，故低劑量通常視毒理學(xué)考慮而定）。

• 為考察毒性反應(yīng)劑量-反應(yīng)關(guān)系，應(yīng)在高劑量和低劑量之間設(shè)立中劑量。(中劑量的暴露通常是低劑量的適當(dāng)倍數(shù)或高劑量的適當(dāng)分?jǐn)?shù)。)

• 臨床用藥途徑為靜脈或肌注時(shí),3個(gè)月及以上的試驗(yàn),由于試驗(yàn)周期長(zhǎng)大鼠給藥有困難,可用腹腔或皮下注射代替。

• 臨床用藥途徑為口服時(shí),可采用口服、灌胃或片劑、膠囊給藥,也可混于飼料中給予。

• 灌胃給藥可將供試藥物制成一種溶液或混懸液，但必須注意給藥容量不應(yīng)超過(guò)1~2ml/100g體重/天。

• 優(yōu)點(diǎn)：給藥劑量精確;時(shí)間易于掌握；從藥動(dòng)學(xué)角度出發(fā)符合臨床給藥的實(shí)際情況。

• 缺點(diǎn)：技術(shù)要求高(誤入氣管)；屬外界刺激。

• 原則上長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中動(dòng)物應(yīng)每天給藥，給藥期限長(zhǎng)（3 個(gè)月或以上）的藥物每周至少應(yīng)給藥 6 天。
• 特殊類型的受試物由于其毒性特點(diǎn)和臨床給藥方案等原因，應(yīng)根據(jù)具體藥物的特點(diǎn)設(shè)計(jì)給藥頻率。

1. 臨床單次用藥的藥物，給藥期限為 2 周的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)通?？芍?span>持其進(jìn)行臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)。
2. 臨床療程不超過(guò) 2 周的藥物，給藥期限為 1 個(gè)月的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)通?？芍С制溥M(jìn)行臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)。
3. 臨床療程超過(guò) 2 周的藥物，可以在臨床前一次性進(jìn)行支持其進(jìn)入III 期臨床試驗(yàn)（及生產(chǎn)）的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)；也可以通過(guò)不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)來(lái)分別支持其進(jìn)入 I 期、II 期或 III 期臨床試驗(yàn)（及生產(chǎn)）。
4. 一般 1 個(gè)月的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)可支持用藥時(shí)間不超過(guò) 2 周的 I期臨床試驗(yàn)，

5. 通過(guò)給藥期限較短的毒性研究獲得的信息，可以為給藥期限較長(zhǎng)的毒性研究設(shè)計(jì)提供給藥劑量、給藥頻率等方面的參考；

6. 同時(shí)，臨床試驗(yàn)中獲得的信息有助于給藥期限較長(zhǎng)的動(dòng)物毒性研究方案的設(shè)計(jì)，降低藥物開(kāi)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

7. 以不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)來(lái)分別支持藥物進(jìn)入 I 期、II 期或III 期臨床試驗(yàn)（及生產(chǎn)）時(shí)，不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的內(nèi)容應(yīng)完整、規(guī)范，對(duì)結(jié)果的分析評(píng)價(jià)應(yīng)科學(xué)、合理。

• 按我國(guó)藥政管理部門(mén)的要求，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的給藥期限一般為臨床療程的3~4倍時(shí)間。創(chuàng)新藥品試驗(yàn)周期應(yīng)不少于90天，超過(guò)180天的新藥可以在試驗(yàn)開(kāi)始90天后，同時(shí)進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)。（創(chuàng)新藥物是指具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)專利的藥物。相對(duì)于仿制藥,創(chuàng)新藥物強(qiáng)調(diào)化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎或新的治療用途，在以前的研究文獻(xiàn)或?qū)＠?，均未?jiàn)報(bào)道。）

• 每天最好固定給藥時(shí)間

• 血液學(xué)指標(biāo)觀察時(shí)間：

• 非嚙齒類動(dòng)物：一般整個(gè)試驗(yàn)周期中每隔1.5-2個(gè)月才血測(cè)定一次
• 嚙齒類動(dòng)物：
1. 試驗(yàn)周期為6個(gè)月時(shí)，可于試驗(yàn)中期、試驗(yàn)?zāi)┢谝约盎謴?fù)期分別剖殺部分動(dòng)物(約1/4、2/4、1/4),進(jìn)行各項(xiàng)檢查;
2. 試驗(yàn)周期為3個(gè)月時(shí),可于試驗(yàn)未期以及恢復(fù)期分別剖殺部分動(dòng)物(約2/3、1/3),取血檢查。

• 血液生化學(xué)注意事項(xiàng)：

• 采血時(shí)從各組中隨機(jī)捉取動(dòng)物，樣本不能溶血、凝血

• 使用足夠數(shù)量的動(dòng)物采樣前禁食12小時(shí)使用合適的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法，注意劑量-反應(yīng)關(guān)系；

• 將所得資料和數(shù)據(jù)與同種、同齡、同性別、同生理狀況的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的資料加以比較分析。

• 除必需的檢測(cè)指標(biāo)外，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)受試物的特點(diǎn)，有針對(duì)性地增加相應(yīng)的檢測(cè)指標(biāo)。

• 應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行外觀體征（皮毛）、行為活動(dòng)、攝食量、體重、糞便性狀、給藥局部反應(yīng)、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)等的觀測(cè)。
• 非嚙齒類動(dòng)物還應(yīng)進(jìn)行體溫、心電圖、眼科檢查和尿液分析。

• 應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)周期的長(zhǎng)短和受試物的特點(diǎn)確定檢測(cè)時(shí)間和檢測(cè)次數(shù)。原則上應(yīng)盡早發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)，并反映出觀測(cè)指標(biāo)或參數(shù)的變化與給藥期限的關(guān)系。

• 一般觀察：動(dòng)物被毛、皮膚、眼睛、黏膜、孔道（及其分泌物）、呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、軀體和肢體活動(dòng)情況以及精神行為進(jìn)行仔細(xì)觀察；

• 對(duì)于動(dòng)物糞便的量、色澤和內(nèi)含物，散失的食物，飲水瓶中殘余的水以及可以反應(yīng)動(dòng)物生活情況變化的各種跡象，都必須加以注意。所有出現(xiàn)的癥狀都必須記錄在案。

• 如果發(fā)現(xiàn)動(dòng)物死亡，必須盡早進(jìn)行尸體剖檢，以減少組織自溶，并將組織置于10%的中性福爾馬林或其他固定液中。如果尸體剖檢不能立即進(jìn)行，則必須將動(dòng)物冷藏起來(lái)以延緩組織自溶。

• 對(duì)于頻死的動(dòng)物也應(yīng)該立即處死做尸體剖檢，組織病理學(xué)檢查、評(píng)價(jià)。

• 統(tǒng)計(jì)體重、飲水量
  

• 統(tǒng)計(jì)食耗：用于評(píng)價(jià)給藥對(duì)食欲及食物利用率的影響（食耗=食物開(kāi)始總重量減剩余飼料重量，除以給食天數(shù)）。給藥組和對(duì)照組的食耗加以比較，有助于說(shuō)明藥物是否影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的食欲。

• 如對(duì)食欲有影響，則每日進(jìn)食量必然減少，體重增長(zhǎng)亦受影響，但此時(shí)食物利用率并不一定降低。

• 若不影響食欲，體重增長(zhǎng)卻下降，表明藥物有可能影響食物的吸收或合成代謝，此時(shí)食物利用率就必然有變化。

• 應(yīng)對(duì)動(dòng)物（除恢復(fù)期觀察動(dòng)物）進(jìn)行全面的大體解剖（每組活殺2/3-1/2，留下1/3-1/2），主要臟器應(yīng)稱重并計(jì)算臟器系數(shù)。確定靶器官。
  
  
  
• 器官重量：將動(dòng)物處死后取出上述器官，除去附著的組織、除盡余血后立即稱重（注意勿使組織干燥）。
• 器官重量降低，表示該器官萎縮或發(fā)育不良
• 器官重量增加，提示可能有充血、水腫、增生、肥大、酶誘導(dǎo)變化或新生物等。
• 組織病理學(xué)檢查對(duì)判斷動(dòng)物的毒性靶器官或靶組織具有重要的意義，病理學(xué)檢查報(bào)告應(yīng)經(jīng)檢查者簽名和病理檢查單位蓋章，如發(fā)現(xiàn)有異常變化，應(yīng)附有相應(yīng)的組織病理學(xué)照片。
• 非嚙齒類動(dòng)物對(duì)照組和各給藥組主要臟器組織均應(yīng)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查；
• 嚙齒類動(dòng)物對(duì)照組和高劑量給藥組動(dòng)物，以及尸檢異常者應(yīng)詳細(xì)檢查，如某一組織發(fā)生病理改變，其他劑量組動(dòng)物該組織也應(yīng)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

⑤ 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)應(yīng)在給藥結(jié)束后對(duì)部分動(dòng)物進(jìn)行恢復(fù)期觀察，以了解毒性反應(yīng)的可逆程度和可能出現(xiàn)的延遲性毒性反應(yīng)。應(yīng)根據(jù)受試物的代謝動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)、靶器官或靶組織的毒性反應(yīng)和恢復(fù)情況確定恢復(fù)期的長(zhǎng)短。

• 一般最后一次給藥物后24小時(shí),每組活殺部分動(dòng)物檢測(cè)上述各項(xiàng)指標(biāo),留下1/3~1/4動(dòng)物進(jìn)行恢復(fù)期觀察。觀察期一般不超過(guò)28天,而后再活殺檢查上述所有指標(biāo),以了解毒性反應(yīng)的可逆程度和可能出現(xiàn)的延遲性毒性反應(yīng)。

• 主要目的：可以描述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的系統(tǒng)暴露與暴露劑量、暴露時(shí)間和毒理學(xué)結(jié)果之間的關(guān)系。解釋長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的結(jié)果。
• 次要目的：
• 闡述毒性研究所達(dá)到的暴露量與毒性發(fā)現(xiàn)的相關(guān)性，以評(píng)價(jià)這些結(jié)果與臨床安全性之間的相關(guān)性。
• 支持非臨床毒性研究的動(dòng)物種屬選擇和給藥方案設(shè)計(jì)；
• 毒代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)應(yīng)選擇合適的時(shí)間點(diǎn)采樣測(cè)定，從而獲得藥時(shí)曲線下面積（AUC）、峰濃度（ C max ）、達(dá)峰時(shí)間（ T max ）等參數(shù)。
• 某些藥物應(yīng)結(jié)合藥物血漿蛋白結(jié)合率來(lái)評(píng)價(jià)系統(tǒng)暴露量。應(yīng)考慮因種屬差異導(dǎo)致的蛋白結(jié)合、組織攝取、受體性質(zhì)和代謝特點(diǎn)的不同。
• 毒代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)可以來(lái)自長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的全部動(dòng)物，也可以來(lái)自部分動(dòng)物。
• 建議此部分動(dòng)物應(yīng)包括低、中、高劑量組的動(dòng)物，以便估算高劑量藥物在動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程是否屬非線性動(dòng)力學(xué)過(guò)程。
• 當(dāng)選擇的劑量呈非線性動(dòng)力學(xué)時(shí)，應(yīng)特別注意對(duì)毒性研究中毒理學(xué)發(fā)現(xiàn)的解釋。但是，非線性動(dòng)力學(xué)不一定用作毒性研究劑量限制的依據(jù)或依此否定毒理學(xué)發(fā)現(xiàn)的價(jià)值。此情況下，毒代動(dòng)力學(xué)研究將有助于評(píng)價(jià)劑量與暴露量間的相關(guān)性。
• 呈非線性動(dòng)力學(xué)原因可能有：
• 由于清除過(guò)程飽和所導(dǎo)致的非線性動(dòng)力學(xué)可引起非預(yù)期的暴露增加，此增加也可能發(fā)生于血漿半衰期特別長(zhǎng)的化合物。還應(yīng)密切關(guān)注在給藥間隔內(nèi)相對(duì)較短時(shí)間內(nèi)達(dá)到高 Cmax 的化合物。
• 反之，代謝酶的自身誘導(dǎo)可能會(huì)導(dǎo)致研究過(guò)程中出現(xiàn)非預(yù)期的低暴露。
• 毒代動(dòng)力學(xué)信息可有效支持的毒性試驗(yàn)包括單次和重復(fù)給藥毒性、生殖毒性、遺傳毒性和致癌性試驗(yàn)。毒代動(dòng)力學(xué)信息對(duì)擬改變臨床給藥途徑的評(píng)價(jià)也有一定價(jià)值。
• 鼓勵(lì)創(chuàng)新性藥物進(jìn)行毒代動(dòng)力學(xué)研究。

• 應(yīng)正確理解均值數(shù)據(jù)和單個(gè)數(shù)據(jù)的意義。

• 應(yīng)綜合考慮數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義。正確利用統(tǒng)計(jì)學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)有助于確定試驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義，但具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義并不一定代表具有生物學(xué)意義。在判斷生物學(xué)意義時(shí)應(yīng)考慮到參數(shù)變化的劑量-反應(yīng)關(guān)系、其他相關(guān)參數(shù)的改變，以及與歷史背景數(shù)據(jù)的比較。

• 此外，在對(duì)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析時(shí)，應(yīng)對(duì)異常數(shù)據(jù)進(jìn)行合理的解釋。

• 給藥組和對(duì)照組之間檢測(cè)參數(shù)的差異可能來(lái)自于與受試物有關(guān)的毒性反應(yīng)、動(dòng)物對(duì)藥物的適應(yīng)性改變或正常的生理波動(dòng)。
• 在分析試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，應(yīng)關(guān)注參數(shù)變化的劑量－反應(yīng)關(guān)系、組內(nèi)動(dòng)物的參數(shù)變化幅度和性別差異，同時(shí)綜合考慮多項(xiàng)毒理學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果，分析其中的關(guān)聯(lián)和作用機(jī)制，以正確判斷藥物的毒性反應(yīng)。
• 單個(gè)參數(shù)的變化往往并不足以判斷化合物是否引起毒性反應(yīng)，可能需要進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)的研究。
• 此外毒代動(dòng)力學(xué)研究可以為毒性反應(yīng)和毒性靶器官或靶組織的判斷提供重要的參考依據(jù)。

• 首先，不同物種、同物種不同種屬或個(gè)體之間對(duì)于某一受試物的毒性反應(yīng)可能存在差異；
• 其次，由于在長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中通常采用較高的給藥劑量，受試物可能在動(dòng)物體內(nèi)呈非線性動(dòng)力學(xué)代謝過(guò)程，從而導(dǎo)致與人體無(wú)關(guān)的毒性反應(yīng)；
• 另外，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)難以預(yù)測(cè)一些在人體中發(fā)生率較低的毒性反應(yīng)或僅在小部分人群中出現(xiàn)的特異質(zhì)反應(yīng)；同時(shí)有些毒性反應(yīng)目前在動(dòng)物中難以檢測(cè)，如頭痛、頭昏、頭暈、腹脹、皮膚搔癢、視物模糊等。

• 鑒于以上原因，動(dòng)物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的結(jié)果一般不會(huì)完全再現(xiàn)于人體臨床試驗(yàn)。但如果沒(méi)有試驗(yàn)或文獻(xiàn)依據(jù)證明受試物對(duì)動(dòng)物的毒性反應(yīng)與人體無(wú)關(guān)，在進(jìn)行藥物評(píng)價(jià)時(shí)必須首先假設(shè)人最為敏感，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中動(dòng)物的毒性反應(yīng)將會(huì)在臨床試驗(yàn)中再現(xiàn)。

• 進(jìn)行深入的作用機(jī)制研究將有助于判斷動(dòng)物和人體毒性反應(yīng)的相關(guān)性。

• 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)是藥物非臨床安全性研究的有機(jī)組成部分，是藥物非臨床毒理學(xué)研究中綜合性最強(qiáng)、獲得信息最多和對(duì)臨床指導(dǎo)意義最大的一項(xiàng)毒理學(xué)研究。對(duì)其結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，應(yīng)結(jié)合受試物的藥學(xué)特點(diǎn)，藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)和其他毒理學(xué)研究的結(jié)果，以及已取得的臨床研究的結(jié)果，進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。
• 對(duì)于長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)最終應(yīng)落實(shí)到受試物的臨床不良反應(yīng)、臨床毒性靶器官或靶組織、安全范圍、臨床需重點(diǎn)檢測(cè)的指標(biāo)，以及必要的臨床監(jiān)護(hù)或解救措施。

6. 結(jié)語(yǔ)

• 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以及對(duì)于結(jié)果的分析和評(píng)價(jià)都應(yīng)圍繞其目的而進(jìn)行。

• 通過(guò)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，應(yīng)該能夠?qū)τ谑茉囄锏呐R床不良反應(yīng)、臨床毒性靶器官或靶組織、安全范圍、臨床需重點(diǎn)檢測(cè)的指標(biāo)，以及必要的臨床監(jiān)護(hù)或解救措施做出合理的預(yù)測(cè)和判斷。

• 在于估算I期臨床試驗(yàn)的起始劑量：長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中測(cè)得的受試物的最大耐受量（按體表面積計(jì)算）是估算 I 期臨床試驗(yàn)起始劑量的重要因素之一。通常 I 期臨床試驗(yàn)起始劑量不應(yīng)高于嚙齒類動(dòng)物最大耐受量的1/10 和非嚙齒類動(dòng)物最大耐受量的 1/6。在估算 I 期臨床試驗(yàn)起始劑量時(shí)，還應(yīng)同時(shí)考慮到動(dòng)物和人體之間生理、生化以及藥代動(dòng)力學(xué)等方面的差異。
• 預(yù)測(cè)受試物的毒性靶器官、毒性的性質(zhì)、程度、劑量反應(yīng)關(guān)系和可逆性。
• 與其他藥物比較，細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)更關(guān)注受試物的最大耐受量。

• 根據(jù)受試物不同的生物學(xué)特點(diǎn)選擇合適的試驗(yàn)動(dòng)物，一般分別采用嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行。

• 一般至少設(shè)立高、中、低三個(gè)劑量給藥組和一個(gè)溶媒（或輔料）對(duì)照組。

• 經(jīng)結(jié)構(gòu)改造獲得的化合物或特殊給藥體系應(yīng)考慮增加母體化合物或原劑型對(duì)照組。

• 試驗(yàn)給藥劑量應(yīng)統(tǒng)一按體表面積表示。

• 高劑量應(yīng)充分暴露受試物的毒性反應(yīng)，并盡量尋找到受試物的最大耐受量；

• 低劑量應(yīng)可引起動(dòng)物出現(xiàn)較輕的毒性反應(yīng)。

• 給藥途徑和給藥方式（例如靜脈滴注和靜脈注射等）應(yīng)盡量與臨床擬定的用法一致。

• 由于細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物可能具有蓄積或延遲毒性，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的恢復(fù)期一般不應(yīng)短于 28天。

• 在細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物的開(kāi)發(fā)過(guò)程中，推薦選擇用不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)來(lái)分別支持不同階段的臨床試驗(yàn)，以降低開(kāi)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。也可以在臨床前完成支持藥物上市的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)。

• 通常，注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)在臨床試驗(yàn)前完成嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物連續(xù)給藥至少 2 個(gè)給藥循環(huán)或 4 周的重復(fù)給藥試驗(yàn)。

• 雖然申請(qǐng)人在臨床I/II 期試驗(yàn)中常常會(huì)探索不同的給藥方案，但原則上，支持受試物進(jìn)行 I/II 期臨床試驗(yàn)的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的給藥期限不應(yīng)短于臨床試驗(yàn)周期，給藥間隔不能長(zhǎng)于臨床試驗(yàn)中的最短給藥間隔。

• 在 III 期臨床試驗(yàn)前，申請(qǐng)人應(yīng)完成給藥期限通常為 6~8 個(gè)給藥循環(huán)或 6 個(gè)月的重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)，試驗(yàn)的給藥頻率應(yīng)盡量與擬定的 III 期臨床試驗(yàn)用藥頻率相同。

• 除常規(guī)觀測(cè)指標(biāo)外，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)受試物特點(diǎn)、文獻(xiàn)報(bào)道和同類藥物已知的臨床不良反應(yīng)（如骨髓毒性、神經(jīng)毒性、胃腸道毒性、心臟毒性等），設(shè)計(jì)具有針對(duì)性的觀測(cè)指標(biāo)或進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

1. 局部刺激性試驗(yàn)：細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物可能直接對(duì)用藥局部產(chǎn)生毒性作用，應(yīng)在I期臨床試驗(yàn)前完成臨床擬用途徑的局部刺激性試驗(yàn)。此項(xiàng)試驗(yàn)可單獨(dú)進(jìn)行，也可結(jié)合長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)進(jìn)行。
2. 毒代動(dòng)力學(xué)：毒代動(dòng)力學(xué)結(jié)果既可以描述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的暴露量與給藥劑量、暴露時(shí)間和毒理學(xué)結(jié)果之間的關(guān)系，也可用于估算受試物的安全范圍，為I期臨床耐受性試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供參考。細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物應(yīng)在長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中進(jìn)行毒代動(dòng)力學(xué)研究。
   
   

化學(xué)藥物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則覆蓋面更廣，應(yīng)首要遵循。

下節(jié)講解：長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的劑量確定方法