2024年9月，西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院楊謹(jǐn)教授團(tuán)隊(duì)在期刊《Heliyon》（IF：3.4）在線發(fā)表題為：Patient-derived organoids and mini-PDX for predicting METN375S-mutated lung cancer patient clinical therapeutic response 的高水平研究論文。

總之，我們的研究結(jié)果證明了PDO在預(yù)測(cè)癌癥藥物反應(yīng)方面的潛力，并揭示了METN375Smutant癌癥治療的一種有前景的策略。

1. 建立了26種來(lái)自不同亞型肺癌的PDO模型，包括良性腫瘤、腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺鱗癌、大細(xì)胞癌和小細(xì)胞癌。這些PDO在長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中保留了原發(fā)腫瘤的主要基因組和組織學(xué)特征。
2. 發(fā)現(xiàn)攜帶METN375S突變的肺癌對(duì)阿法替尼具有選擇性敏感性，這為METN375S突變肺癌的治療提供了新的潛在策略。
3. 揭示了阿法替尼和吉西他濱聯(lián)合使用在PDO和mini-PDX模型中對(duì)METN375S突變肺癌具有合成致死性，這可能是一種有前途的治療策略。
4. 通過(guò)靶向基因組測(cè)序，研究揭示了攜帶METN375S突變的肺癌對(duì)特定藥物的敏感性，這有助于指導(dǎo)臨床治療決策。
5. 使用了3D培養(yǎng)系統(tǒng)來(lái)模擬體內(nèi)組織的物理框架，并通過(guò)添加分化誘導(dǎo)生長(zhǎng)因子來(lái)完成3D培養(yǎng)，有助于更準(zhǔn)確地模擬腫瘤微環(huán)境，為研究腫瘤細(xì)胞與微環(huán)境相互作用提供了新平臺(tái)。
6. 
   

Q1: PDO模型是如何從肺癌患者樣本中獲取和培養(yǎng)的？

A: 研究者首先從手術(shù)切除的肺癌患者樣本中收集肺組織（大約1-3 cm3）。這些樣本在無(wú)血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室，并在1-2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行處理。組織樣本用含有2%抗生素的冷PBS洗滌三次，并切成小塊。一小塊組織用于蘇木精-伊紅染色（HE）/免疫組化（IHC），另一塊組織用于測(cè)序，其余組織用于PDO模型的培養(yǎng)。將患者的組織放入含有無(wú)血清先進(jìn)DMEM/F12培養(yǎng)基和1ml Liberase TH的15ml離心管中，在37°C下保持30分鐘并間歇性搖動(dòng)。充分解離后，使用無(wú)菌移液管反復(fù)吹打組織懸液以分離細(xì)胞。通過(guò)70μm細(xì)胞濾器過(guò)濾細(xì)胞懸液，然后在4°C下以500g離心5分鐘，再用含有2%抗生素的PBS清洗。最后，將細(xì)胞在無(wú)血清的先進(jìn)DMEM/F12培養(yǎng)基中重懸，加入Matrigel建立PDO，然后在預(yù)加熱的24孔培養(yǎng)板中固化。

Q2: METN375S突變?cè)诜伟┲委熤械囊饬x是什么？

A: METN375S突變是肺癌中MET基因的一種突變形式，它在東亞人群中的發(fā)生率約為13%，而在非洲裔美國(guó)人中則為0%。這種突變被認(rèn)為可以導(dǎo)致更具侵略性的腫瘤表型。在這項(xiàng)研究中，攜帶METN375S突變的肺癌細(xì)胞對(duì)阿法替尼顯示出特別的敏感性。此外，阿法替尼和吉西他濱的聯(lián)合使用在METN375S突變肺癌的PDO和mini-PDX模型中誘導(dǎo)了合成致死性，表明這種聯(lián)合療法可能是治療METN375S突變肺癌的有前途的策略。

Q3: 研究中是如何評(píng)估藥物對(duì)PDO的效果的？

A: 評(píng)估藥物對(duì)PDO效果的方法包括將PDO在24孔板中培養(yǎng)2-3周，然后使用TrypLE Express收集和解離，再在96孔板中以2×10^3細(xì)胞每孔的密度進(jìn)行種植。藥物在種植后24小時(shí)加入。藥物孵育3天后，使用CTG進(jìn)行細(xì)胞活性檢測(cè)。這種方法允許研究者評(píng)估不同藥物對(duì)PDO的敏感性，并預(yù)測(cè)患者對(duì)特定藥物的治療反應(yīng)。