抗核抗體 (ANA) 是對細(xì)胞核抗原具有不同特異性的自身抗體的總稱。ANA一般分為可提取核抗原 (ENA) 抗體、不可提取性抗原抗體和胞質(zhì)抗原抗體。

ANA無器官特異性和種屬特異性, 大多數(shù)屬于IgG類抗體, 僅少部分屬IgM和IgA。目前對ANA的研究已不再僅僅局限于細(xì)胞核成分, 其靶抗原的分布已由傳統(tǒng)的細(xì)胞核拓展到整個(gè)細(xì)胞, 除細(xì)胞核外, 還包括細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂周期蛋白等。

抗M2抗體

高效價(jià)的抗M2抗體是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標(biāo)志，丙酮酸脫氫酶復(fù)合物的酶E2和蛋白X為主要的靶抗原。另外，在其它慢性肝臟疾病和進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(SCL)中也可檢出抗M2抗體，但主要為低效價(jià)。抗M2抗體陽性的SCL患者，很可能臨床重疊有原發(fā)性膽汁性肝硬化。

抗著絲點(diǎn)抗體

主要出現(xiàn)在系統(tǒng)性硬化癥 ( PSS）中，尤其是 CREST 綜合征（系統(tǒng)性硬化癥的變異型，臨床表現(xiàn)為軟組織鈣化、雷諾現(xiàn)象、食道功能障礙、指端硬化、毛細(xì)血管擴(kuò)張），出現(xiàn)此抗體時(shí)，在 CREST 綜合征患者中極少觀察到心肺腎的病變，有助于硬皮病的診斷和分類，也可見于原發(fā)性膽汁性肝硬化。抗著絲點(diǎn)抗體與 SCL-70 相排斥即 SCL-70 陽性，出現(xiàn)肺纖維化幾率高；抗著絲點(diǎn)抗體陽性，出現(xiàn)內(nèi)臟損害少。

抗SCL-70抗體

該抗體主要在硬化癥 ( SD）中出現(xiàn)，且其抗原分子量為 70 KD 而得名。抗SCL-70抗體多見于進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化患者, 而局限型硬化癥不出現(xiàn)?？?SCL-70 抗體陽性者易發(fā)生肺纖維化，但心腎損害較少。 

抗dsDNA抗體

抗dsDNA抗體對于診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (SLE) 有較高特異性, 尤其針對活動期SLE患者中低度較高, 該抗體可以作為SLE的活動性和治療效果檢測指標(biāo); 除抗Sm抗體外，抗dsDNA 抗體也可作為該病的一個(gè)血清學(xué)指標(biāo)，陽性率為40%~90%。

抗核小體抗體（AnuA）

AnuA  可出現(xiàn)于 SLE 的早期，并且敏感性、特異性均較高。在 SLE 患者中陽性率為 50%~90%，特異性 >90%。與健康獻(xiàn)血員或硬化癥、干燥綜合征和多肌炎(PM)患者血清不反應(yīng)。AnuA 可出現(xiàn)在疾病進(jìn)程的各個(gè)時(shí)期，并與疾病的活動性密切相關(guān)。SLE 的早期抗核小體抗體比抗 dsDNA 抗體、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn)。

抗Jo-1抗體

1980 年首次報(bào)道了在原發(fā)性多發(fā)性肌炎患者血清中發(fā)現(xiàn)了抗 Jo-1 抗體。抗Jo-1抗體見于多肌炎，被認(rèn)為是肺病相關(guān)肌炎的標(biāo)志性抗體，常與合并肺間質(zhì)纖維化有關(guān)。

抗Ku抗體

許多自身免疫性疾病都發(fā)現(xiàn)抗 Ku 抗體，包括多發(fā)性肌炎、狼瘡及硬皮病。常見于 SLE 和重疊綜合征。尤其系統(tǒng)性硬皮病與皮肌炎重疊，特異性 99.4%、敏感性 60%。有研究顯示，抗 Ku 抗體的出現(xiàn)可能意味著有發(fā)展成為肌炎的高度危險(xiǎn)。

抗Mi-2抗體

是炎性肌病的血清指標(biāo)之一，對皮肌炎有很強(qiáng)的特異性 (98%～100%) ，但其敏感性只有4%～18%。

抗組蛋白抗體 ( AHA）

抗組蛋白抗體在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn)，故無特異性，但不同的組蛋白亞單位抗體檢測又有不同的臨床意義。藥物性的 SLE 抗組蛋白抗體幾乎都為陽性。當(dāng)血清中 AHA 陽性、抗 SSDNA 陽性，而其他 dsDNA、SM、ＲNP、JO-1 抗體均陰性時(shí)，高度懷疑藥物性 SLE。

抗線粒體抗體( AMA）

抗細(xì)胞周期抗原成分抗體。分為 M1～M9 共 9 個(gè)亞型。AMA-M2 是原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）最為靈敏、特異的診斷標(biāo)志。自身免疫性肝炎、進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥、干燥綜合征、與 PBC 重疊征患者中也可檢測到 AMA-M2 抗體。慢性 HCV、系統(tǒng)性紅斑狼瘡可檢測到低濃度 AMA-M2 抗體。

抗gp210抗體

可與抗線粒體抗體（AMA）同時(shí)出現(xiàn)，抗線粒體抗體（AMA）是PBC 高敏感性血清學(xué)指標(biāo)?？筭p210抗體也存在于20%～47%AMA陰性的PBC患者中，對于臨床、生化和組織學(xué)表現(xiàn)疑似PBC而AMA陰性的患者，或AMA陽性而臨床癥狀不典型、存在重疊綜合征（如與干燥綜合征重疊）的患者，抗gp210抗體檢測有重要價(jià)值。另外gp210陽性患者肝硬化發(fā)生率明顯高于陰性患者，因此該抗體陽性提示患者預(yù)后不良，抗gp210抗體可作為PBC患者的預(yù)后指標(biāo)。

抗核糖體P蛋白抗體

該抗體對抗 ds-DNA 抗體或抗 SM 抗體陰性的 SLE 患者診斷具有參考意義?？购颂求wP蛋白抗體是SLE的特異性標(biāo)志。對于有中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、腎炎或肝炎的SLE患者，該抗體陽性率與整個(gè)SLE人群基本相同。

抗PM-Scl抗體

按疾病多發(fā)性肌炎 ( PM）而命名。在50%-70%的所謂的重疊綜合征患者中可檢出這些抗體，在這些患者中可合并出現(xiàn)多肌炎(PM)、皮肌炎(DM)和進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(SCL)。抗PM-Scl抗體在SCL(彌散型)中的陽性率為3%，在PM和DM中的陽性率為8%。

抗增殖細(xì)胞核抗原抗體 (PCNA)

SLE標(biāo)志性抗體（2-10%），臨床癥狀相關(guān)性不清，可能與SLE彌散性腎小球腎炎相關(guān)。腫瘤細(xì)胞具有旺盛的增殖活性，抗PCNA抗體可以作為細(xì)胞增殖狀態(tài)的指標(biāo)，抗PCNA抗體與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、分級、分期、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后，以及患者對于放、化療的敏感性有關(guān)，如肺癌。所以如果臨床上發(fā)現(xiàn)抗PCNA抗體陽性，要檢查自身免疫性疾病，還要考慮是否存在腫瘤。

抗SmD1抗體

抗SmD1抗體是SLE的特異性標(biāo)志，與抗dsDNA抗體一起，是SLE的診斷指標(biāo)，但陽性率僅為5%~10%。對早期不典型SLE或經(jīng)治療緩解后的SLE回顧性診斷有很大幫助。

抗SS-A抗體

抗體最常見于干燥綜合征(40%~80%)、也見于SLE (30%~40%)和原發(fā)性膽汁性肝硬化(20%中，偶見于慢性活動性肝炎。此外，在100%的新生兒紅斑狼瘡中可出現(xiàn)抗SS-A抗體。該抗體可經(jīng)胎盤傳給胎兒引起炎癥反應(yīng)和新生兒先天性心臟傳導(dǎo)阻滯。

抗SS-B抗體

幾乎僅見于干燥綜合征(40%~80%)和SLE(10%~20%)的女性患者中。在干燥綜合征中抗SS-A抗體和抗SS-B抗體常同時(shí)出現(xiàn)。對于干燥綜合征患者, 抗SSA抗體敏感性較強(qiáng), 抗SSB抗體特異性較高。

高效價(jià)的抗U1-nRNP抗體

抗nRNP抗體有助于鑒別結(jié)締組織和非結(jié)締組織病。高效價(jià)的抗U1-nRNP抗體是混合性結(jié)締組織病(MCTD)的標(biāo)志，陽性率為95%~100%，抗體效價(jià)與疾病活動性相關(guān)。抗U1-nRNP抗體可在多種風(fēng)濕病中存在，并不具有特異性，在30%~40%的SLE患者中可檢出抗U1-nRNP抗體，但幾乎總伴有抗Sm抗體。

抗核抗體的檢測方法較多, 如間接免疫熒光法 (IIF) 、免疫印跡法 (IBT) 、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) 、蛋白芯片法、金標(biāo)法及流式細(xì)胞術(shù)等，但臨床應(yīng)用最為廣泛的還是IIF和IBT。

間接免疫熒光法

間接免疫熒光法該方法是公認(rèn)進(jìn)行ANA篩查的首選方法。

IIF檢測ANA, 主要有以下6種常見熒光染色模型:

 (1) 核均質(zhì)型 , 該型的靶抗原主要有ds DNA、ss DNA、核小體和組蛋白。高滴度主要見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者，低滴度可見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、慢性肝臟疾病、傳染性單核細(xì)胞增多癥或藥物誘發(fā)的狼瘡患者。

(2) 核顆粒型 , 又稱核斑點(diǎn)型或核斑塊型, 可細(xì)分為核粗顆粒型和核細(xì)顆粒型, 靶抗原主要有n RNP、Sm、SS-A和SS-B。高滴度常見于混合性結(jié)締組織病，同時(shí)也見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病及干燥綜合征等自身免疫性疾病。

 (3) 核仁型 , 也可分為核仁顆粒型和核仁均質(zhì)型, 主要包括抗PM-Scl抗體、抗RNA多聚酶Ⅰ抗體、抗原纖維蛋白抗體和抗Scl-70抗體。高滴度對診斷硬皮病具有一定特異性，但也見于雷諾現(xiàn)象者，偶爾也出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡。

 (4) 核膜型， 又稱周邊型，主要由抗 dsDNA 的抗體所引起。高滴度幾乎僅見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡，特別是活動期系統(tǒng)性紅斑狼瘡，其他自身免疫疾病很少見。

 (5) 著絲點(diǎn)型 ，主要的靶抗原是著絲點(diǎn) B 抗原。見于局限性硬皮病及 CREST 綜合征。ANA 的熒光核型對鑒別診斷有一定的提示作用，但要明確是哪一亞類的自身抗體，必須做 ANA 譜系的檢測。

 (6) 胞漿型，即細(xì)胞漿熒光染色陽性, 主要包括抗線粒體抗體 (胞漿粗顆粒型) 、抗核糖體P蛋白抗體 (胞漿細(xì)顆粒型, 有時(shí)可見核仁陽性) 、抗Jo-1抗體、抗高爾基抗體、抗溶酶體抗體、抗肌動蛋白抗體和抗波形蛋白抗體等。此外, 還有一些較少見的熒光染色模型, 如中心粒型、中間體型和紡錘體型等。

ANA 陽性的判定因底物不同而不同，如以常規(guī)的鼠肝或鼠腎為底物，≥ 1：16 稀釋為陽性；以核質(zhì)豐富的 Hep-2 細(xì)胞（人喉癌上皮細(xì)胞）為底物，≥ 1：40 稀釋為陽性；復(fù)合片（Hep-2 細(xì)胞及猴肝切片）≥ 1：100 稀釋為陽性。

應(yīng)用IIF檢測ANA, 在判斷熒光染色模型時(shí)一定要注意有絲分裂期的細(xì)胞，其中期細(xì)胞熒光染色特點(diǎn)對核型判斷具有重要意義。

免疫印跡法

該法亦稱酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印斑法 (EIBT) , 是隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)的興起而逐漸發(fā)展建立起來的一種免疫化學(xué)技術(shù), 最早應(yīng)用于DNA和RNA的檢測鑒定。

該方法是將經(jīng)SDS-PAGE電泳分離的蛋白質(zhì)組份精確的近似定量的轉(zhuǎn)印至一固相載體, 并保持其生物活性不變, 使待測的抗體與附著于固相載體上所呈現(xiàn)的抗原表位發(fā)生特異性的反應(yīng), 以達(dá)到檢測、鑒定的目的，是檢測蛋白特異性、表達(dá)與分布最常用的方法。

最初將IBT應(yīng)用于自身抗體的檢測, 主要是檢測可提取核抗原 (ENA) , ENA是核物質(zhì)中一類蛋白質(zhì)的總稱, 這類核蛋白的共同特點(diǎn)是不含有組蛋白, 且均能溶解于生理鹽水和磷酸鹽緩沖液, 其檢測濃度可達(dá)到pg水平。

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編輯：笪文武  審校：陳雪禮